En högkvalitativ adenosindeaminasanalyssats

Adenosindeaminas (ADA) är ett naturligt enzym som är involverat i immunsvaret. Adenosindifosfats (ADP) funktion är att aktivera cellerna och utföra membranpermeabilisering och cytotoxisk effekt. Adenosin har identifierats som en av de viktigaste aminosyrorna som krävs för normal mänsklig hjärnaktivitet. Det syntetiseras av levern och distribueras i blodplasma genom inverkan av immunsystemet. Adenosindifosfat är en bärare av det antivirala genetiska materialet. I Biomedical Expo kommer ADA Activity Assay Kit att användas i kombination med det tidigare nämnda BioVision Cytokine.

Adenosindifosfat (ADP) är en bärare av T-lymfocyttillväxtfaktor. I BioVision Cytokine extraheras adenosindeaminas (ADO) från den dissekerade njuren och analyseras med hjälp av kommersiellt tillgänglig spektrofotometrisk automatiserad analys. Reagenset förbehandlades med anti-fosfo-dGlucose (PI) för att förhindra dess reaktion med analyten.

Sammansättningen av det kommersiellt tillgängliga AIDA Activity Assay Kit innehåller två huvudkomponenter - reagenset och laboratorieutrustningen. Reagenserna i Aida Activity Assay Kit inkluderar renad enzymcocktail (Sigma-FCA). Laboratorieutrustningen består av en mikroplattskanner (monterad bakom ett mikroskopglas), glasföremål, standardkurvresultatbok och sköljflaska. Före användning måste proverna från Aida Activity Assay Kit tvättas med avklorerat vatten. Användningen av reagens och laboratorieutrustning är inte begränsad till endast laboratorietester.

För att undersöka förmågan hos Aida Activity Assay Kit att mäta total adenosindeaminasaktivitet, genomfördes flera experimentella sessioner. Den första sessionen bestod av fyra dagars manuell spårning. Etthundrafemtio mikroliter Aida-GFP löstes i kranvatten och blandades med fosfatbuffrad saltlösning. Efter tjugo minuter testades proverna på HPLC-massbalansskärmen.

Den andra sessionen inkluderade ytterligare två dagars manuell spårning. Prover injicerades på kurvkassetten under två timmar såsom beskrivits ovan. Den tredje sessionen inkluderade ytterligare tre dagars manuell spårning i samma rum, följt av fyra timmars subkutana injektioner av adenosindeaminas (ADCA). Blodprovet togs efter en timme för analys.

För salivtestningen blandades femhundra mikroliter standardlösningar av deaminas och pH-steg i en icke-steril stans. Grisarna fick dricka en hel rad vätskor, från vanligt vatten till dietläsk, efter önskemål. När standardlösningarna nådde sin kokpunkt sattes en droppare med en förutbestämd volym saliv in och adenosindeaminasaktiviteten mättes.

Den sista gruppen om sex prover analyserades med ett kommersiellt tillgängligt salivbaserat fosforimidazolaminanalyskit (Saproflavil; Thermo Instruments). I denna uppsättning analyser blandades en enda droppe fosforimidazoleamin/saliv ada-reagens med en volym kranvatten och det torkade pulvret sattes till proverna. Efter trettio minuter togs ett andra prov av samma prov. I detta fall mättes aktiviteten i saliven omedelbart. Satsen hade utformats specifikt för att mäta aktiviteten av syran i mänsklig saliv. Som väntat fanns det en betydande mängd aktivitet som kunde detekteras.

Som väntat gav båda analysatorerna liknande resultat. Den mycket specifika karaktären hos salivary-Positron Emission Tomography (SPECT)-analysen, tillsammans med den mycket känsliga metoden (hög intraoral vätskedetektion) resulterade i genomgående hög noggrannhet och betydande mätningar. Laboratoriepersonalen som användes för procedurerna var alla experter på området. Det fanns inga bevis på kontaminering eller någon form av experimentfel. Testpersonerna gav informerat samtycke och proceduren följde rekommendationerna från American Association of Clinical Endocrinologists. Sammantaget visade resultaten från Adenosine Deaminase Assay Kit god reproducerbarhet, vilket bekräftades av separata studier från oberoende kliniska laboratorier.