NEFA Assay Kit är ett verktyg för att kvantifiera NEFA

NEFA Assay Kit är ett verktyg för kvantifiering av NEFA (kväveoxid). Det används för att bestämma koncentrationen av NEFA i blod- eller vävnadsprover. NEFA är ett viktigt näringsämne som är ansvarigt för regleringen av energimetabolism, hjärtexcitabilitet, neuromuskulär ledning, blodtryck och blodpropp. Det finns främst i ben, muskler, mjuka vävnader och röda blodkroppar.

Förberedelse

NEFA är ett litet protein på 50,2 kDa som har förmågan att binda till DNA. Det är ett cytosoliskt typ I fettsyrasyntas (FAS)-komplex som producerar icke-förestrad palmitinsyra. I närvaro av Acyl-CoA-oxidas (ACS) oxiderar FAS-komplexet 3-metyl-N-etyl-N-(b-hydroxietyl)-anilin till 4-aminoantipyrin, som är den molekylära prekursorn för acetyl-CoA. Denna process är en avgörande enzymatisk process för alla eukaryota organismer.

Även om NEFA kanske inte har den rejäla massan av ett fett, är det en viktig bränslekälla för perifera vävnader. Det metaboliseras av levern och transporteras komplexbundet med albumin till perifera vävnader. NEFA frisätts också av en tioesteras (TE) domän av FAS-komplexet.

Pipettering

ELISA-kit används för att detektera små kemiska föreningar, proteiner och peptider. Dessa kit är baserade på rekombinanta proteiner uttryckta i E.coli. Kiten innehåller inte azid, timerosal och andra naturresurser.

I kitet finns reagens som BSA, pyrogenfri spädningsbuffert och tvättlösning. Tvättlösningen är stabil i två veckor vid 2-8°C. Spädningsbufferten innehåller 0,9 % fysiologisk saltlösning.

Satsen har en intern NEFA-standard. Detta spikas med NEFA i en koncentration som matchar den förväntade koncentrationen i provet. Absorbansen av det blålila pigmentet vid 546 nm mäts för att beräkna koncentrationen av NEFA i provet.

Kolorimetrisk

Att använda WAKO NEFA-kitet har framkallat en mängd olika resultat, inklusive några som är meningslösa. Ändå är NEFA-kitet en värdig utmanare när det gäller att bestämma den relativa fettsyrahalten i djurvävnadsprover. Som sådan är NEFA-kitet ett av de mer populära laboratorietesterna. Satsen kommer med instruktioner för att testa olika typer av prover, inklusive blod, serum, saliv och en mängd olika lipider.

Den mest spännande delen av kitet är att det kan användas för att mäta en mängd olika fettsyror, inklusive de som vanligtvis finns i lipider. Satsen kommer med en rad enzymer utformade för att upptäcka en mängd olika fettsyror, inklusive C-8 och C-16 fettsyrorna som finns hos människor och djur. Ändå rekommenderas inte kitet för användning i hög precision FFA-koncentrationer över ett brett intervall.

Elektrokemisk

NEFA är viktiga fettsyror för människors hälsa, men bedöms sällan. Dessutom är deras upptäckt mycket dyrt. Därför kan övervakning av förändringar i deras koncentrationer hjälpa till med mer exakt sjukdomsförebyggande och hantering. I denna studie utvecklades ett elektrokemiskt analyskit för NEFA, med PDA-MWCNT som sensoryta. Denna elektrod uppvisade god elektrokatalytisk aktivitet för NEFA-oxidationssteg och kunde användas i verkliga tillämpningar.

Enzymelektroden bestod av en flerskiktskompositfilm av PDA-MWCNT och ACOD, ACS och polymer. Ordningen på skikten valdes för att matcha den enzymatiska reaktionsordningen. Det fastställdes att ACS och ACOD förblev biologiskt aktiva i filmen.

NEFA-koncentration i T2D

NEFA-koncentrationer i blodet har studerats i samband med fetma och hypertoni. Dessa föreningar har visat sig främja höjd blodtryck genom a1-adrenerg stimulering och öka oxidant stress. NEFA är också associerade med metabolt syndrom. Dessa föreningar kan vara viktiga vid utvecklingen av hypertoni.

Flera modeller har föreslagits för att beskriva plasma-NEFA-svaret på en intravenös glukosutmaning. Boston-modellen skildrade exakt den fjärde fasen av NEFA-koncentrationsökningen. Modellen beskrev dock inte den initiala latensfasen. Fabian-modellen använde en enkel exponentiell lutning för att beskriva denna fas. På liknande sätt kunde Thomaseth-modellen inte beskriva återhämtningsfasen.

NEFA-nivåer i triglycerider

Flera studier har undersökt effekterna av bariatrisk kirurgi på plasma-NEFA-sammansättningen. I en metaanalys publicerad 2016 minskade NEFA-nivåerna i serum 6 och 12 månader efter operationen. Detta kan ha berott på minskade insulinnivåer. I en annan studie mättes plasma NEFAs i en grupp överviktiga patienter före och efter Roux-en-Y gastric bypass-operation.

Koncentrationerna av sju NEFA minskade 9 månader efter operationen. Linoleat (en omega-6-fettsyra) reducerades med 18:2, stearat med 18:0 och oleat med 16:0. Koncentrationen av dokosahexaenoat påverkades dock inte. NEFA omvandlades till fettsyrametylestrar (FAMEs). Dessa analyserades sedan med gaskromatografi-masspektrometri (GC-MS).